A cultura de célula é uma técnica de laboratório bastante usada, onde as células são cultivadas sob condições controladas tipicamente fora do seu ambiente natural.
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A cultura de célula é uma parte importante na biologia celular e molecular, bem como na indústria farmacêutica, pois é útil estudar os efeitos de drogas e compostos tóxicos nas células. Esta característica garante que a cultura de células também desempenha um papel vital na produção de vacinas virais, rastreio e desenvolvimento de medicamentos. Estudos sobre mutagênese e carcinogênese também são possíveis recorrendo a esta técnica.
Devido à exigência crítica de resultados precisos, confiáveis e reprodutíveis dentro desses campos, as culturas de células representam uma grande vantagem para resultados consistentes.
Impacto da água
Culturas contaminadas e morte celular são um grande problema que podem impactar negativamente nos experimentos. A qualidade da água desempenha um papel importante nos resultados experimentais da cultura de células e é utilizada durante todo o processo. Não só é o principal componente dos tampões e meios, como também é utilizada para a dissolução de aditivos e drogas, etc.
A água ultrapura apirogênica (Tipo I) deve ser utilizada para a preparação de meios e tampões de modo a garantir que as células estão isentas de contaminantes bacterianos, de leveduras e virais. A contaminação da cultura celular por iões metálicos, endotoxinas, bactérias ou fungos pode ter um impacto direto ou indirecto na cultura (por exemplo, alterações do pH).
Requisitos da água
Certifique-se de que está a utilizar o tipo de água certo para a sua aplicação. Aqui estão os requisitos para várias aplicações de cultura de células.
Sensibilidade | Resistividade (MΩ.cm) | TOC (ppb) |
Filtração (µm) | Bactérias (UFC/ml) | Endotoxinas (UE/ml) | Nucleases | Pureza da Água | |
Cultura de Células - Bactérias | Média | >1 | <50 | < 0,2 | <1 | N/A | N/A | Tipo II |
Cultura de Células - Mamíferos | Alta | >18 | <10 | Ultrafiltro | <1 | <0,002 | Ausentes | Tipo I |
Cultura de Tecidos de Plantas | Alta | >18 | <10 | Ultrafiltro | <1 | <0,002 | Ausentes | Tipo I |
Histologia | Média | >1 | <50 | < 0,2 | <1 | N/A | N/A | Tipo III |
Hidroponia | Média | >1 | <50 | < 0,2 | <1 | N/A | N/A | k |
Podem assumir a forma de sais de cálcio e magnésio, dióxido de carbono, sais de sódio, silicatos, compostos de ferro ferroso e férrico, cloretos, fosfatos de alumínio e nitratos de uma variedade de ambientes e condições diferentes. Composto inorgânico é qualquer composto que não possui um átomo de carbono. Há um pequeno número de compostos inorgânicos que de facto contêm carbono, dada a sua propensão para formar ligações moleculares; estes incluem por exemplo, monóxido de carbono e dióxido de carbono.
Os compostos inorgânicos são muitas vezes bastante simples, uma vez que não formam as ligações moleculares complexas que o carbono torna possível. Um exemplo comum de um composto inorgânico simples é o cloreto de sódio, conhecido mais vulgarmente como sal doméstico. Este composto contém apenas dois átomos, sódio (Na) e cloro (Cl).
Impacto nos sistemas: Mesmo em níveis vestigiais, os compostos orgânicos podem afetar as reações orgânicas e bioquímicas, uma vez que atuam muitas vezes como catalisadores.
Contaminantes antropogênicos da agricultura, resíduos domésticos e industriais podem também aumentar o número de compostos orgânicos encontrados nas águas natural e potável. Os orgânicos dissolvidos podem suportar o crescimento de uma grande variedade de microrganismos e, portanto, têm o potencial de interromper várias aplicações biológicas.
Impacto nos sistemas: As técnicas analíticas estão em maior risco de ganhar impurezas orgânicas dissolvidas e podem também ter impacto em experiências biológicas, tais como culturas celulares. Relativamente à cromatografia líquida, quaisquer contaminações nos efluentes podem resultar em instabilidade de linha de base, sensibilidade e resolução diminuídas, podendo também afetar a vida útil da coluna.
Apesar de a cloração remover bactérias nocivas, a água potável continuará contendo micro-organismos vivos. As bactérias são tipicamente controladas na água potável através do uso de cloro ou outros desinfetantes semelhantes, no entanto, uma vez que estes são removidos durante o processo de purificação da água, existe a possibilidade de ocorrer proliferação de bactérias.
Impacto nos sistemas: As bactérias podem interferir numa infinidade de experiências laboratoriais, quer diretamente quer através de subprodutos, tais como pirogênios, fosfatase alcalina ou nucleases.
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